猕猴繁殖生物学
前言
第一篇 猕猴属动物概况
第1章 猕猴属分类、分布与保护现状
1.1 猕猴属动物概况
1.2 猕猴属的分类与系统发育关系
1.3 猕猴属的起源与演化
1.4 猕猴属的地理分布及生物地理
第2章 猕猴的分类、分布与保护
2.1 猕猴的分类
2.2 猕猴的分布
2.2.1 地理分布
2.2.2 生态地理分布
2.3 猕猴的生态与行为
2.3.1 社群、群体大小与组成
2.3.2 家域与食性
2.3.3 社会行为与相互关系
2.4 猕猴资源的利用与保护现状
参考文献
第二篇 猕猴的生殖生理
第3章 雌性猕猴生殖器官解剖组织结构及生理特性
3.1 卵巢
3.1.1 猕猴卵巢组织解剖结构
3.1.2 卵泡发生和卵泡闭锁现象
3.1.3 卵巢的周期性
3.1.4 卵泡动力学与生殖激素
3.2 输卵管
3.3 子宫及子宫颈
3.4 阴道及外生殖器
第4章 雄性猕猴生殖器官解剖组织结构与生理特性
4.1 睾丸
4.1.1 睾丸解剖结构
4.1.2 睾丸组织细胞结构
4.1.3 睾丸位置的变化与性成熟
4.2 附睾
4.3 精液和精子
4.4 副性腺
4.4.1 精囊腺
4.4.2 前列腺
4.4.3 尿道球腺
4.5 外生殖器
4.5.1 阴茎
4.5.2 阴囊
4.6 雄性性腺激素
4.6.1 睾酮与ICSH
4.6.2 抑制素B与FSH
4.6.3 前列腺素
第5章 配子的产生
5.1 原始生殖细胞的特化
5.2 原始生殖细胞的迁移
5.3 原始生殖细胞的性别分化
5.4 精子的发生和发育
5.5 卵细胞的发生和发育
5.5.1 原始滤泡的形成
5.5.2 原始滤泡的激活和生长
5.5.3 卵母细胞的发育及成熟
5.6 猕猴卵母细胞的体外成熟培养
5.6.1 猕猴卵细胞体外成熟无血清培养体系的建立
5.6.2 影响猕猴卵细胞体外成熟的因子
5.6.3 雌性个体的年龄和生殖周期对猕猴卵细胞成熟的影响
5.7 排卵
第6章 着床前胚胎的发育
6.1 受精
6.1.1 精卵识别：透明带及其在精卵识别中的功能
6.1.2 精子的顶体反应
6.1.3 卵细胞的皮层反应
6.2 着床前胚胎发育
6.2.1 母源因子对早期胚胎发育的调控
6.2.2 着床前胚胎发育的表观遗传特征
6.2.3 早期胚胎发育的细胞命运决定
第7章 猕猴性成熟和性行为
7.1 雌性猕猴的性成熟
7.2 性皮肤
7.3 性行为
参考文献
第三篇 猕猴的辅助生殖技术
第8章 猕猴的体外受精与胚胎移植
8.1 精子采集
8.1.1 精液采集的方法与原理
8.1.2 电刺激采集猕猴精液
8.1.3 精液液化
8.2 超数排卵
8.2.1 灵长类超数排卵的研究历史
8.2.2 影响超数排卵的几种因素
8.2.3 超数排卵中的巨型卵泡的影响
8.2.4 预知超数排卵失败的因素
8.2.5 卵供体动物的选择和超数排卵处理最佳方案
8.2.6 猕猴超数排卵失败的几种原因
8.2.7 超数排卵和卵母细胞采集的流程
8.3 猕猴卵母细胞体外成熟培养方法
8.3.1 卵巢中分离未成熟卵母细胞的分离培养
8.3.2 超数排卵未成熟卵母细胞分离培养及操作要点（腹腔镜介导取卵）
8.4 体外受精、单精子注射、孤雌激活
8.4.1 猕猴的体外受精技术
8.4.2 单精子注射
8.4.3 孤雌激活
8.5 猕猴胚胎移植
8.5.1 胚胎移植受体的选择
8.5.2 胚胎移植的部位与方法
8.5.3 猕猴早期妊娠诊断
8.5.4 猕猴妊娠后的阴道流血
附件1猕猴超数排卵计划和任务书编写内容
附件2猕猴超数排卵实时记录表
第9章 胚胎分割
9.1 胚胎分割的研究简史
9.2 胚胎分割的应用
9.3 灵长类胚胎分割的研究进展
9.4 胚胎分割的原理和方法
9.4.1 胚胎分割的原理
9.4.2 胚胎分割的方法
9.4.3 分割胚胎的培养与发育
9.4.4 影响分割胚发育的因素
9.5 猕猴胚胎分割技术
9.5.1 桑椹胚和囊胚期胚胎分割
9.5.2 猕猴胚胎
9.5.3 胚胎分割方法
9.5.4 分割胚的体外培养
9.5.5 分割胚的移植
9.5.6 猕猴早期胚胎卵裂球分割（分离）
第10章 种质细胞冷冻保存
10.1 猕猴种质资源冷冻保存的意义和研究进展
10.2 种质细胞冷冻保存的原理
10.2.1 细胞冷冻保存的原理
10.2.2 细胞冷冻损伤的假说
10.2.3 冷冻保护剂的种类和作用
10.3 猕猴精子的冷冻保存
10.3.1 猕猴精子的低温生物学特征
10.3.2 渗透性冷冻保护剂的浓度和种类对猕猴冷冻复苏精子功能的影响
10.3.3 非渗透性冷冻保护剂——糖对猕猴冷冻复苏精子功能的影响
10.3.4 猕猴精子冷冻保存的方法
10.4 猕猴卵母细胞和胚胎的冷冻保存
10.4.1 卵母细胞的低温生物学特征
10.4.2 猕猴卵母细胞冷冻保存的方法
10.4.3 猕猴胚胎冷冻保存的方法（慢速冷冻和玻璃化冷冻法）
第11章 猕猴胚胎干细胞
11.1 猕猴胚胎干细胞的分离与鉴定
11.1.1 非人灵长类胚胎干细胞的分离建系
11.1.2 非人灵长类胚胎干细胞的鉴定
11.1.3 非人灵长类胚胎干细胞培养体系的改进
11.1.4 胚胎干细胞分离技术的改进
11.2 猕猴胚胎干细胞的分离建系与培养
11.2.1 小鼠胚胎成纤维细胞的培养
11.2.2 小鼠胚胎成纤维细胞的冻存
11.2.3 小鼠胚胎成纤维细胞的辐照处理
11.2.4 小鼠胚胎成纤维细胞的复苏
11.2.5 小鼠胚胎成纤维细胞的丝裂霉素处理和饲养层细胞的准备
11.2.6 猕猴着床前胚胎的体外培养
11.2.7 猕猴胚胎干细胞的分离
11.3 猕猴胚胎干细胞的鉴定
11.3.1 猕猴胚胎干细胞的形态学观察
11.3.2 猕猴胚胎干细胞免疫荧光染色的鉴定
11.3.3 猕猴胚胎干细胞核型的鉴定
11.3.4 猕猴胚胎干细胞的体外分化
11.3.5 猕猴胚胎干细胞的体内分化
第12章 猕猴转基因技术
12.1 引言
12.2 转基因动物的原理和技术方法
12.2.1 显微注射法
12.2.2 反转录病毒载体导入法
12.2.3 体细胞核移植法
12.2.4 人工染色体介导法
12.2.5 性腺转基因方法
12.2.6 定点制作转基因动物的方法
12.3 转基因猕猴制备技术
12.3.1 制备高滴度的VSVG假型慢病毒
12.3.2 病毒滴度测定
12.3.3 实验动物：供体和受体的选择
12.3.4 超排和取卵
12.3.5 卵周隙注射慢病毒
12.3.6 体外培养
12.3.7 辅助孵化
12.3.8 受体猴的选择及胚胎移植
12.3.9 怀孕的确认和监测
12.3.1 0新生猴的护理
12.3.1 1新生动物的转基因确认
12.3.1 2基因组DNA提取、PCR分析和Southern杂交分析
12.3.1 3转基因猕猴组织的免疫组织化学分析
12.4 转基因猕猴的应用与展望
参考文献
第四篇 猕猴的繁殖管理
第13章 猕猴的饲养与管理
13.1 饲养环境
13.1.1 动物笼舍
13.1.2 温度
13.1.3 相对湿度
13.1.4 光照
13.1.5 噪声
13.2 猕猴的饲养管理
13.2.1 检疫猴群管理
13.2.2 繁殖猴群管理
13.2.3 幼猴的人工抚育
13.2.4 其他猴群饲养管理
第14章 猕猴的营养需求
14.1 猕猴的习性
14.1.1 猕猴的食性
14.1.2 消化
14.2 猕猴的营养需要与饲养标准
14.2.1 维持需要
14.2.2 生产需要
14.2.3 猕猴的饲养标准
14.3 猕猴饲料配方设计
14.3.1 正确选择猕猴的饲养标准
14.3.2 采用合理的饲料配方设计方法
14.3.3 添加剂预混料配方设计
14.3.4 原料选择
14.3.5 实验验证，确定合理配方
第15章 猕猴常见疾病及其防治
15.1 细菌性疾病
15.1.1 沙门菌病
15.1.2 细菌性痢疾
15.1.3 细菌性肺炎
15.1.4 结核病
15.2 病毒性疾病
15.2.1 猴疱疹病毒感染
15.2.2 猴D型反转录病毒感染
15.2.3 猴免疫缺陷病毒感染
15.2.4 猴痘
15.2.5 猴出血热
15.2.6 猴麻疹
15.3 寄生虫病
15.3.1 阿米巴病
15.3.2 结肠小袋纤毛虫
15.3.3 毛首鞭形线虫
15.3.4 鞭毛虫
15.3.5 粪类圆线虫病
第16章 猕猴的福利管理
16.1 动物福利概述
16.2 我国动物福利现状
16.3 猕猴福利管理
16.3.1 饲养环境福利
16.3.2 猕猴营养
16.3.3 猕猴的检疫与疾病治疗
16.3.4 饲养环境的多样性
16.3.5 生物医学研究中猕猴的福利
第17章 国内外有关实验动物的法律法规
17.1 中国
17.2 欧洲
17.3 美国
17.4 日本
参考文献
附录缓冲液和培养液配制表
索引
第一篇 猕猴属动物概况
第1章 猕猴属分类、分布与保护现状
1.1 猕猴属动物概况
1.2 猕猴属的分类与系统发育关系
1.3 猕猴属的起源与演化
1.4 猕猴属的地理分布及生物地理
第2章 猕猴的分类、分布与保护
2.1 猕猴的分类
2.2 猕猴的分布
2.2.1 地理分布
2.2.2 生态地理分布
2.3 猕猴的生态与行为
2.3.1 社群、群体大小与组成
2.3.2 家域与食性
2.3.3 社会行为与相互关系
2.4 猕猴资源的利用与保护现状
参考文献
第二篇 猕猴的生殖生理
第3章 雌性猕猴生殖器官解剖组织结构及生理特性
3.1 卵巢
3.1.1 猕猴卵巢组织解剖结构
3.1.2 卵泡发生和卵泡闭锁现象
3.1.3 卵巢的周期性
3.1.4 卵泡动力学与生殖激素
3.2 输卵管
3.3 子宫及子宫颈
3.4 阴道及外生殖器
第4章 雄性猕猴生殖器官解剖组织结构与生理特性
4.1 睾丸
4.1.1 睾丸解剖结构
4.1.2 睾丸组织细胞结构
4.1.3 睾丸位置的变化与性成熟
4.2 附睾
4.3 精液和精子
4.4 副性腺
4.4.1 精囊腺
4.4.2 前列腺
4.4.3 尿道球腺
4.5 外生殖器
4.5.1 阴茎
4.5.2 阴囊
4.6 雄性性腺激素
4.6.1 睾酮与ICSH
4.6.2 抑制素B与FSH
4.6.3 前列腺素
第5章 配子的产生
5.1 原始生殖细胞的特化
5.2 原始生殖细胞的迁移
5.3 原始生殖细胞的性别分化
5.4 精子的发生和发育
5.5 卵细胞的发生和发育
5.5.1 原始滤泡的形成
5.5.2 原始滤泡的激活和生长
5.5.3 卵母细胞的发育及成熟
5.6 猕猴卵母细胞的体外成熟培养
5.6.1 猕猴卵细胞体外成熟无血清培养体系的建立
5.6.2 影响猕猴卵细胞体外成熟的因子
5.6.3 雌性个体的年龄和生殖周期对猕猴卵细胞成熟的影响
5.7 排卵
第6章 着床前胚胎的发育
6.1 受精
6.1.1 精卵识别：透明带及其在精卵识别中的功能
6.1.2 精子的顶体反应
6.1.3 卵细胞的皮层反应
6.2 着床前胚胎发育
6.2.1 母源因子对早期胚胎发育的调控
6.2.2 着床前胚胎发育的表观遗传特征
6.2.3 早期胚胎发育的细胞命运决定
第7章 猕猴性成熟和性行为
7.1 雌性猕猴的性成熟
7.2 性皮肤
7.3 性行为
参考文献
第三篇 猕猴的辅助生殖技术
第8章 猕猴的体外受精与胚胎移植
8.1 精子采集
8.1.1 精液采集的方法与原理
8.1.2 电刺激采集猕猴精液
8.1.3 精液液化
8.2 超数排卵
8.2.1 灵长类超数排卵的研究历史
8.2.2 影响超数排卵的几种因素
8.2.3 超数排卵中的巨型卵泡的影响
8.2.4 预知超数排卵失败的因素
8.2.5 卵供体动物的选择和超数排卵处理最佳方案
8.2.6 猕猴超数排卵失败的几种原因
8.2.7 超数排卵和卵母细胞采集的流程
8.3 猕猴卵母细胞体外成熟培养方法
8.3.1 卵巢中分离未成熟卵母细胞的分离培养
8.3.2 超数排卵未成熟卵母细胞分离培养及操作要点（腹腔镜介导取卵）
8.4 体外受精、单精子注射、孤雌激活
8.4.1 猕猴的体外受精技术
8.4.2 单精子注射
8.4.3 孤雌激活
8.5 猕猴胚胎移植
8.5.1 胚胎移植受体的选择
8.5.2 胚胎移植的部位与方法
8.5.3 猕猴早期妊娠诊断
8.5.4 猕猴妊娠后的阴道流血
附件1猕猴超数排卵计划和任务书编写内容
附件2猕猴超数排卵实时记录表
第9章 胚胎分割
9.1 胚胎分割的研究简史
9.2 胚胎分割的应用
9.3 灵长类胚胎分割的研究进展
9.4 胚胎分割的原理和方法
9.4.1 胚胎分割的原理
9.4.2 胚胎分割的方法
9.4.3 分割胚胎的培养与发育
9.4.4 影响分割胚发育的因素
9.5 猕猴胚胎分割技术
9.5.1 桑椹胚和囊胚期胚胎分割
9.5.2 猕猴胚胎
9.5.3 胚胎分割方法
9.5.4 分割胚的体外培养
9.5.5 分割胚的移植
9.5.6 猕猴早期胚胎卵裂球分割（分离）
第10章 种质细胞冷冻保存
10.1 猕猴种质资源冷冻保存的意义和研究进展
10.2 种质细胞冷冻保存的原理
10.2.1 细胞冷冻保存的原理
10.2.2 细胞冷冻损伤的假说
10.2.3 冷冻保护剂的种类和作用
10.3 猕猴精子的冷冻保存
10.3.1 猕猴精子的低温生物学特征
10.3.2 渗透性冷冻保护剂的浓度和种类对猕猴冷冻复苏精子功能的影响
10.3.3 非渗透性冷冻保护剂——糖对猕猴冷冻复苏精子功能的影响
10.3.4 猕猴精子冷冻保存的方法
10.4 猕猴卵母细胞和胚胎的冷冻保存
10.4.1 卵母细胞的低温生物学特征
10.4.2 猕猴卵母细胞冷冻保存的方法
10.4.3 猕猴胚胎冷冻保存的方法（慢速冷冻和玻璃化冷冻法）
第11章 猕猴胚胎干细胞
11.1 猕猴胚胎干细胞的分离与鉴定
11.1.1 非人灵长类胚胎干细胞的分离建系
11.1.2 非人灵长类胚胎干细胞的鉴定
11.1.3 非人灵长类胚胎干细胞培养体系的改进
11.1.4 胚胎干细胞分离技术的改进
11.2 猕猴胚胎干细胞的分离建系与培养
11.2.1 小鼠胚胎成纤维细胞的培养
11.2.2 小鼠胚胎成纤维细胞的冻存
11.2.3 小鼠胚胎成纤维细胞的辐照处理
11.2.4 小鼠胚胎成纤维细胞的复苏
11.2.5 小鼠胚胎成纤维细胞的丝裂霉素处理和饲养层细胞的准备
11.2.6 猕猴着床前胚胎的体外培养
11.2.7 猕猴胚胎干细胞的分离
11.3 猕猴胚胎干细胞的鉴定
11.3.1 猕猴胚胎干细胞的形态学观察
11.3.2 猕猴胚胎干细胞免疫荧光染色的鉴定
11.3.3 猕猴胚胎干细胞核型的鉴定
11.3.4 猕猴胚胎干细胞的体外分化
11.3.5 猕猴胚胎干细胞的体内分化
第12章 猕猴转基因技术
12.1 引言
12.2 转基因动物的原理和技术方法
12.2.1 显微注射法
12.2.2 反转录病毒载体导入法
12.2.3 体细胞核移植法
12.2.4 人工染色体介导法
12.2.5 性腺转基因方法
12.2.6 定点制作转基因动物的方法
12.3 转基因猕猴制备技术
12.3.1 制备高滴度的VSVG假型慢病毒
12.3.2 病毒滴度测定
12.3.3 实验动物：供体和受体的选择
12.3.4 超排和取卵
12.3.5 卵周隙注射慢病毒
12.3.6 体外培养
12.3.7 辅助孵化
12.3.8 受体猴的选择及胚胎移植
12.3.9 怀孕的确认和监测
12.3.1 0新生猴的护理
12.3.1 1新生动物的转基因确认
12.3.1 2基因组DNA提取、PCR分析和Southern杂交分析
12.3.1 3转基因猕猴组织的免疫组织化学分析
12.4 转基因猕猴的应用与展望
参考文献
第四篇 猕猴的繁殖管理
第13章 猕猴的饲养与管理
13.1 饲养环境
13.1.1 动物笼舍
13.1.2 温度
13.1.3 相对湿度
13.1.4 光照
13.1.5 噪声
13.2 猕猴的饲养管理
13.2.1 检疫猴群管理
13.2.2 繁殖猴群管理
13.2.3 幼猴的人工抚育
13.2.4 其他猴群饲养管理
第14章 猕猴的营养需求
14.1 猕猴的习性
14.1.1 猕猴的食性
14.1.2 消化
14.2 猕猴的营养需要与饲养标准
14.2.1 维持需要
14.2.2 生产需要
14.2.3 猕猴的饲养标准
14.3 猕猴饲料配方设计
14.3.1 正确选择猕猴的饲养标准
14.3.2 采用合理的饲料配方设计方法
14.3.3 添加剂预混料配方设计
14.3.4 原料选择
14.3.5 实验验证，确定合理配方
第15章 猕猴常见疾病及其防治
15.1 细菌性疾病
15.1.1 沙门菌病
15.1.2 细菌性痢疾
15.1.3 细菌性肺炎
15.1.4 结核病
15.2 病毒性疾病
15.2.1 猴疱疹病毒感染
15.2.2 猴D型反转录病毒感染
15.2.3 猴免疫缺陷病毒感染
15.2.4 猴痘
15.2.5 猴出血热
15.2.6 猴麻疹
15.3 寄生虫病
15.3.1 阿米巴病
15.3.2 结肠小袋纤毛虫
15.3.3 毛首鞭形线虫
15.3.4 鞭毛虫
15.3.5 粪类圆线虫病
第16章 猕猴的福利管理
16.1 动物福利概述
16.2 我国动物福利现状
16.3 猕猴福利管理
16.3.1 饲养环境福利
16.3.2 猕猴营养
16.3.3 猕猴的检疫与疾病治疗
16.3.4 饲养环境的多样性
16.3.5 生物医学研究中猕猴的福利
第17章 国内外有关实验动物的法律法规
17.1 中国
17.2 欧洲
17.3 美国
17.4 日本
参考文献
附录缓冲液和培养液配制表
索引
季维智，男，汉族，安徽省合肥市人，中共党员，生于1950年6月29日。博士研究生导师。历任中国科学院昆明研究室副主任、主任、副所长。担任中国科学院昆明研究所第四任所长、所党委委员、研究员。云南省动物生殖生物学重点实验室主任。从事生殖发育生物学研究。以非人灵长类为模式动物进行卵母细胞的成熟调控机制，胚胎的早期发育分化以及相关生殖生物技术，如生殖细胞（卵、精子和胚胎）的冻存，胚胎移植，动物克隆和灵长类胚胎干细胞研究。率先在国际上建立了猕猴卵成熟的无血清培养体系，并发现激素、能量物质和生殖周期对卵成熟和胚胎早期发育的影响。
《猕猴繁殖生物学》猕猴是生物医学研究的重要模式动物之一，在生物医学科研和生物技术、药物开发工程中，具有不可替代的地位。《猕猴繁殖生物学》是作者根据多年工作的积累和当前国内外研究动态编写而成。主要内容包括：①猕猴分类及生态状况，是研究者和管理人员必须了解的基本内容。②猕猴生殖系统结构与功能以及生殖生理，是从事相关研究的基础，也是猕猴生产的重要基础。③猕猴辅助生殖技术，是现代生物技术的基础，《猕猴繁殖生物学》从超数排卵、卵细胞的成熟、体外受精和胚胎移植，包括胚胎干细胞的建系等做了系统的介绍。许多研究成果属于一次报道，对干细胞研究、基因操作技术等都有非常重要的参考价值。④猕猴繁殖管理，是猕猴生产与应用的重要环节，是确保猕猴高效生产，研究一致性、可重复性、可塑性关键所在。其所介绍的内容都是国际现行的标准，其中有关猕猴的福利要求是人们尊重猕猴权利的重要体现，也是国内多数养殖单位所不足的方面，或是研究者不够重视的方面。
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