全国高等农林院校研究生教材：植物显微技术

　　目录第二版前言代序第一版前言第一篇 植物制片技术第一章 植物制片的目的和方法概述 2第一节 植物制片的目的、类型和方法 2第二节 植物制片的一般流程 3一、一般制片的步骤 4二、石蜡制片的主要步骤 4三、半薄切片的主要步骤 5第三节 常用仪器、用具、药品 5一、常用仪器 5二、常用实验用具 6三、常用文具 6四、药品及染料的规格 6第四节 制片前的准备工作 7一、玻璃器皿的清洁 7二、实验计划、制片日程表 8第二章 石蜡制片法 9第一节 材料的选择与分割 9一、取样 9二、植物器官的分割 10三、染色体制片取样 11第二节 固定与保存 11一、固定的原理和方法 12二、固定液 13三、固定操作步骤 15四、材料的冲洗 15五、固定时需要注意的问题 16六、常用器具 17第三节 脱水 17一、脱水的目的 18二、常用的脱水剂及脱水与复水方法 18三、脱水时注意事项 18第四节 透明 19一、透明的目的 19二、常用的透明剂 19三、透明的方法 19第五节 浸蜡 20一、浸蜡的目的 20二、浸蜡方法和步骤 20第六节 包埋 21一、包埋剂 21二、石蜡的种类 21三、石蜡的选择 22四、各级石蜡的配制与包埋前的准备 22五、包埋方法 23第七节 切片 24一、切片机、切片刀种类及应用 25二、切片机的组成与使用 25三、切片刀的准备 26四、蜡块的分割、修整与固着 27五、切片方法与步骤 27六、石蜡切片过程易出现的问题及解决的办法 27第八节 展片与粘片 28一、展片、粘片 28二、常用粘贴剂及其配制 29三、展片、粘片方法及注意事项 30第九节 脱蜡与透明 30一、脱蜡与透明 30二、石蜡制片中常用的脱蜡剂与透明剂 31三、脱蜡方法 31第十节 染料与染色 31一、染色的目的 31二、染料的分类 31三、几种常用染料的性质及配制 32四、染色原理简介 36五、一般的染色方法 36六、染色注意事项 37第十一节 封藏 39一、封藏的目的 39二、封藏剂种类 39三、封藏方法 39第三章 石蜡制片实例 40一、根尖纵切片制片法 40二、茎的纵、横切片制片法 41三、叶横切片制片法 43四、花芽纵切片制片法 44五、子房纵切片制片法 45六、花生子叶横切片制片法 47七、线粒体制片法——雷加特氏法 47第四章 其他切片法 49第一节 徒手切片法 49一、徒手切片概述 49二、徒手切片实例 49第二节 冰冻切片法 50一、冰冻切片概述 50二、冰冻切片机 50三、冰冻切片方法 51四、冰冻切片注意事项 51第三节 滑走切片法 51一、滑走切片法概述 51二、滑走切片机组成与使用 52三、滑走切片法研究木材结构注意事项 52四、滑走切片实例 54第五章 非切片制片法 56第一节 压片、涂片制片法 56一、压片、涂片制片方法及在植物学研究中的应用 56二、压片制片法 56三、涂片制片法 58第二节 整体制片法 59一、整体透明法 60二、蚕豆叶或鸭跖草叶表皮制片 62三、小麦叶表皮制片 62四、棉胚乳整体制片 63第三节 离析法 64一、木材解离制片 64二、胚囊酶法分离技术 65第六章 半薄切片、超薄切片与扫描电镜样品制备 67第一节 半薄切片和超薄切片法常用试剂 67一、几种常用固定液的配制 67二、脱水剂 69三、渗透剂 69四、包埋剂 69五、常用染料 71第二节 半薄切片制样方法 73一、半薄切片方法简介 73二、半薄切片制样步骤 73三、半薄切片法在植物学研究中的应用 77第三节 超薄切片制样方法 78一、超薄切片制样步骤 79二、超薄切片法在植物学研究中的应用 84第四节 扫描电子显微镜样品的制备 85一、整体样品表面结构观察的制样方法 85二、扫描电子显微镜制样中的关键步骤 86三、扫描电子显微镜在植物学研究中的应用 89第五节 冷冻超薄切片制样方法简介 90一、冷冻超薄切片原理 90二、冷冻超薄切片方法 90三、低温包埋技术 92四、冷冻超薄切片在植物学研究中的应用 94第七章 原位杂交与组织化学 95第一节 原位杂交技术 95一、植物染色体原位杂交技术 95二、RNA原位杂交技术 100第二节 组织切片原位PCR 104一、原位PCR技术的基本原理 104二、基本类型 104三、原位PCR基本步骤 105第三节 植物组织化学 106一、核酸的测定 106二、细胞内含物的测定 107三、细胞壁物质的测定 109第四节 GUS及荧光检测 110一、GUS组织化学染色 110二、免疫组织化学检测 111三、非免疫荧光标记 111第二篇 显微镜与显微摄影技术第八章 显微镜 114第一节 显微镜基本知识 114一、显微镜的种类 114二、透镜成像的基本知识 115三、光路简介 116四、复式显微镜结构原理 116五、显微镜的参数 117第二节 显微镜的结构和性能 120一、光学系统 120二、机械部件 123三、推进器和显微测微尺 125四、显微镜的保养 127五、显微镜的维护 128第三节 几种常用显微镜简介 131一、复式显微镜的原理、结构与使用 131二、体视显微镜的原理、结构与使用 135三、荧光显微镜的原理、结构与使用 141四、倒置显微镜的原理、结构与使用 147五、激光共聚焦显微镜简介 150六、电子显微镜的原理、结构与使用 150第四节 几种显微技术的应用 156一、荧光显微术 157二、相差显微术 159三、微分干涉术 161四、偏光显微术 164五、暗视野显微术 166第九章 显微摄影成像装置 168第一节 摄影和照相机的发展历史 168一、摄影术的含义和发明 168二、照相机的发明和发展 169第二节 照相机的类型和结构 170一、照相机的类型 170二、照相机的主要结构 172第三节 照相机的使用方法 174一、曝光和曝光量 174二、调焦 175三、控制景深 176四、控制清晰度 176五、数码相机简介 177六、CCD相机简介 183第十章 显微摄影技术 184第一节 显微摄影技术概论 184一、图像采集 184二、图像存储 184三、图像处理 185四、图像转换 185五、显微成像技术的展望 185第二节 近距离摄影 185一、构图 186二、测光、曝光 186三、表现力 186四、近距离拍摄实例 186五、消费型相机佳能Power Shot Prol结构功能简介 187第三节 小物体（微距）摄影 188一、正确操控相机 188二、微距拍摄实例 190三、专业数码单反相机Nikon D200结构功能简介 191第四节 超微距摄影（解剖镜摄影） 194一、超微距摄影装置 194二、超微距摄影实例 195第五节 高倍率显微摄影（显微镜摄影） 197一、高倍率显微摄影装置 197二、高倍率显微摄影实例 198第六节 获得高质量显微图像与常见拍摄问题分析 199一、相机握持的方式 200二、如何判别一张模糊的图像 201三、显微摄影采用的器材 201四、如何虚化背景、突出主体 202五、如何在暗弱光线下不使用闪光灯进行拍照 202六、怎样合理使用曝光补偿 202七、如何微距拍摄具有大面积绿色叶片背景的小花 203八、怎样正确使用相机的白平衡 203九、解剖镜下（超微距）摄影如何调光 203十、高倍率显微摄影如何正确调焦 203十一、Photoshop软件后期处理时如何适度锐化 204十二、Photoshop软件后期处理时如何去除数码图像阴霾 204第十一章 显微图像分析处理 205第一节 显微图像处理 205一、显微图像获得的几种方式 205二、图像存储格式 205三、图像处理方法 206四、图像输出方式 208五、发表文章电子图版的基本要求 208第二节 专业显微图像处理分析软件 208一、Simple PCI软件 208二、Image-ProPlus（IPP）软件 209三、MetaMorph （MM）软件 211四、Cytogenetics细胞遗传学工作站 212五、两款免费的专业显微图像分析软件 212六、显微图像分析对硬件的基本要求 213第三篇 植物显微技术实验指导实验一 石蜡制片法（一） 216一、实验目的与原理 216二、实验材料 216三、实验试剂及用具 216四、操作步骤 216五、实验效果 218实验二 石蜡制片法（二） 219一、实验目的与原理 219二、实验材料 219三、实验试剂及用具 219四、包埋的操作步骤 219五、包埋的效果 221实验三 石蜡制片法（三） 222一、实验目的与原理 222二、实验材料 222三、实验试剂及用具 222四、操作步骤 222五、实验结果分析 224实验四 石蜡制片法（四） 225一、实验目的与原理 225二、实验材料 225三、实验试剂及用具 225四、操作步骤 225五、实验结果分析 227实验五 半薄切片法 228一、实验目的与原理 228二、实验材料 228三、实验试剂及用具 228四、操作步骤 228实验六 超薄切片法 232一、实验目的与原理 232二、实验材料 232三、实验试剂及用具 232四、操作步骤 232五、实验结果 233实验七 冰冻切片法 234一、实验目的与原理 234二、实验材料 234三、实验试剂及用具 234四、操作步骤 234五、冰冻切片实例：拟南芥花序轴横切片 235六、冰冻切片法中影

　　《植物显微技术》是据编者近30年的教学、科研积累及实验技能整理而成。主要介绍了植物显微技术中广泛应用和实用的内容与方法，包括：植物制片技术（石蜡切片、半薄切片、冰冻切片、超薄切片、冰冻超薄切片、扫描电镜样品制备、木材切片）、原位杂交、原位PCR、植物组织化学、GUS及荧光检测方法、细胞组织分离制片、整体透明技术、胚囊酶法分离技术、整体制片技术，显微镜的结构、原理、使用和保养，显微测量，专用显微技术（荧光显微术、相差显微术、偏光显微术、微分干涉显微术、暗视野显微术），以及摄影装置和显微摄影技术（微距摄影、体视显微镜摄影、显微摄影）。《植物显微技术》图文并茂，既论述了实验方法与原理，又突出了实验技术要点，并附有详尽相关实验指导，便于教学安排及自学查阅。