第二版前言
第一版前言
第一篇 生化分离技术
第一章 提取与沉淀分离技术
第一节 细胞破碎
一、机械破碎法
二、物理破碎法
三、化学破碎法
四、酶促破碎法
第二节 提取
一、提取的方法
二、影响提取的因素
第三节 沉淀分离
一、盐析沉淀法
二、等电点沉淀法
三、有机溶剂沉淀法
四、复合沉淀法
五、金属盐沉淀法
六、选择性变性沉淀法
第四节 实验
实验1-1 大肠杆菌细胞的超声波破碎
实验1-2 枯草杆菌碱性磷酸酶的提取与盐析
实验1-3 枯草杆菌DNA的提取与分离
实验1-4 酵母RNA的提取与分离
实验1-5 大蒜细胞SOD的提取与分离
实验1-6 大鼠肝rRNA的提取与分离
第二章 过滤与膜分离技术
第一节 非膜过滤
一、非膜过滤的分类
二、非膜过滤的操作过程
第二节 膜分离技术
一、膜分离的分类
二、膜分离的操作过程及其控制
第三节 实验
实验2-1 胰凝乳蛋白酶的透析脱盐
实验2-2 糖化酶的超滤分离
第三章 萃取分离技术
第一节 有机溶剂萃取
一、有机溶剂的选择
二、有机溶剂萃取的操作过程
第二节 双水相萃取
一、双水相萃取的原理
二、双水相萃取的操作过程
第三节 超临界萃取
一、超临界萃取的原理
二、超临界萃取的操作过程
第四节 反胶束萃取
一、反胶束萃取的原理
二、反胶束萃取的操作过程
第五节 实验
实验3-1 青蒿素的超临界萃取分离
实验3-2 人生长激素的双水相萃取分离
实验3-3 穿心莲内酯的有机溶剂萃取
第四章 层析分离技术
第一节 吸附层析
一、吸附层析原理
二、吸附柱层析
三、聚酰胺薄膜层析
四、其他吸附层析
第二节 分配层析
一、纸层析
二、薄层层析
三、气相层析
第三节 离子交换层析
一、离子交换剂的选择与处理
二、离子交换层析的操作过程
第四节 凝胶层析
一、凝胶层析的基本原理
二、凝胶的选择与处理
三、凝胶层析操作过程
第五节 亲和层析
一、亲和层析母体和配基
二、亲和层析方法
第六节 层析聚焦
一、交换剂和缓冲液体系
二、pH梯度的形成
三、层析聚焦的操作过程
第七节 实验
实验4-1 蛋白质溶液的凝胶层析脱盐
实验4-2 氨基酸的纸层析
实验4-3 核苷酸的离子交换层析
实验4-4 胰蛋白酶的亲和层析
实验4-5 凝胶层析测定蛋白质的相对分子质量
实验4-6 DNS一氨基酸的聚酰胺薄膜层析
实验4-7 醇酯成分的气相层析
实验4-8 胆酸混合液的薄层层析
第五章 电泳技术
第一节 电泳的基本原理
第二节 纸电泳
一、缓冲液的选择
二、滤纸的选择与剪裁
三、电泳操作要点
第三节 薄层电泳
第四节 薄膜电泳
第五节 凝胶电泳
一、聚丙烯酰胺凝胶的制备原理
二、不连续电泳中样品压缩成层的原理
三、SDS凝胶电泳原理
四、凝胶电泳的操作要点
第六节 等电点聚焦电泳
一、稳定pH梯度的形成
二、两性电解质载体
三、支持pH梯度的介质
四、等电点聚焦电泳的操作要点
第七节 实验
实验5-1 核苷酸的纸电泳
实验5-2 蛋白质的醋酸纤维薄膜电泳
实验5-3 DNA的琼脂糖凝胶电泳
实验5-4 蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶电泳
实验5-5 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质的相对分子质量
实验5-6 蛋白质的二元凝胶电泳
第六章 离心分离技术
第一节 离心机的选择
一、常速离心机
二、高速离心机
三、超速离心机
第二节 离心方法的选择
一、差速离心
二、密度梯度离心
三、等密度梯度离心
第三节 离心条件的确定
一、离心力
二、离心时间
三、温度
四、pH值
第四节 实验
实验6-1 细菌核糖体的分离
实验6-2 大肠杆菌细胞膜的分离
实验6-3 RNA的蔗糖密度梯度离心分离
实验6-4 大鼠肝细胞核的分离
第二篇 生化检测技术
第七章 化学检测技术
第一节 糖类的化学检测
一、兰一爱农(Lane-Eynon)法
二、斐林试剂快速法
三、次碘酸钠法
四、铜试剂法
第二节 蛋白质和氨基酸的化学检测
一、定氮法测定蛋白质的含量
二、双缩脲试剂法测定蛋白质含量
三、福林一酚试剂法测定蛋白质含量
四、蛋白质N-末端氨基酸DNS测定法
五、蛋白质的氨基酸排列顺序测定——Edman法
六、蛋白质N-末端氨基酸FDNB测定法
第八章 光学检测技术
第一节 旋光检测技术
第二节 荧光检测技术
第三节 分光光度检测技术
第四节 实验
第九章 气体检测技术
第一节 华勃氏呼吸仪检压法
第二节 范·斯莱克检测仪测定α-氨基酸含量
第三节 实验
第十章 生物检测技术
第一节 安全性试验
第二节 生长抑制物质的生物效价测定
第三节 生长促进物质的生物效价检测
第四节 实验
第十一章 放射性同位素检测技术
第一节 基本知识
第二节 放射性同位素的检测
第三节 放射性同位素的搀入
第四节 实验
第三篇 酶、基因和细胞操作技术
第十二章 酶技术
第一节 酶生物合成的调节技术
第二节 酶反应动力学的研究
第三节 酶、细胞和原生质体固定化技术
第四节 酶分子修饰技术
第五节 实验
第十三章 基因克隆技术
第一节 基因的获取技术
第二节 载体的制备技术
第三节 DNA体外重组技术
第四节 重组DNA引入受体细胞技术
第五节 重组DNA的鉴定技术
第六节 实验
第十四章 细胞融合技术
第一节 动物细胞融合技术
第二节 原生质体融合技术
第三节 细胞拆合技术
第四节 实验
附录
主要参考文献