第一章 总论
第一节 基因、基因工程与基因工程药学
一、基因与基因工程
二、基因工程药学
第二节 基因工程药学的发展沿革与研究内容
一、从基因工程技术到基因工程药物
二、基因工程药学的主要研究内容
第三节 基因工程药物的类型和临床应用
一、目前已上市的基因工程药物类型
二、几种基因工程药物在临床上的应用情况
第一篇 基因工程药学基础
第二章 分子克隆工具酶
第一节 限制性内切酶
一、限制与修饰
二、限制性内切酶识别的序列
三、限制性内切酶产生的末端
四、DNA末端长度对限制性内切酶切割的影响
五、位点偏爱
六、酶切反应条件
七、星号活性
八、单链DNA的切割
九、酶切位点的引入
十、影响酶活性的因素
十一、酶切位点在基因组中分布的不均一性
第二节 甲基化酶
一、甲基化酶的种类
二、依赖于甲基化的限制系统
三、甲基化对限制酶切的影响
第三节 DNA聚合酶
一、大肠埃希菌DNA聚合酶
二、KlenowDNA聚合酶
三、T4DNA聚合酶
四、T7DNA聚合酶
五、耐热DNA聚合酶
六、反转录酶j
七、末端转移酶
第四节 其他分子克隆工具酶
一、依赖于DNA的RNA聚合酶
二、连接酶
三、T4多核苷酸激酶
四、碱性磷酸酶
五、核酸酶
六、蛋白酶K
七、琼脂糖酶
八、DNA结合蛋白
九、其他酶
第三章 目的基因的获取与重组DNA技术
第一节 化学合成法
一、DNA化学合成的原理
二、DNA化学合成的应用
第二节 基因文库法
一、基因组文库
二、cDNA文库
第三节 重组DNA技术
一、外源DNA与载体的连接
二、重组DNA与导入受体细胞的方法
三、重组体的筛选
第四章 PCR技术及其应用
第一节 PCR技术的发展
第二节 PCR技术的原理和操作
一、PCR的原理
二、PCR的反应体系
三、PCR的反应条件
第三节 几种重要的PCR技术
一、反转录PCR
二、反向PCR
三、不对称PCR
四、原位PCR
五、免疫PCR
六、实时定量PCR
七、PCR-单链构象多态性
八、限制性片段长度多态性PCR
九、序列特异性寡核苷酸多态性PCR
第四节 PCR技术的应用
一、在遗传病诊断和研究中的应用
二、在癌症诊断和研究中的应用
三、在传染病诊断和研究中的应用
四、在基因分型中的应用
五、在法医学中的应用
第五章 原核细胞表达系统
第一节 目的基因的来源
一、化学合成法
二、基因组DNA
三、cDNA文库
四、聚合酶链式反应
第二节 原核表达载体
一、载体
二、常用的原核表达载体
第三节 DNA分子的体外重组与筛选
一、DNA分子的体外重组
二、重组DNA分子导入宿主细胞
三、转化子的筛选和重组子的鉴定
第四节 克隆基因在原核细胞中的表达及实现高效表达的基本策略
一、克隆基因在原核细胞中的表达
二、克隆基因在原核细胞中的表达形式
三、实现原核细胞中高效表达的基本策略
第六章 真核细胞表达系统
第一节 哺乳动物细胞表达系统
一、哺乳动物基因表达载体的组成
二、哺乳动物基因表达载体的类型
三、哺乳动物基因表达的宿主细胞
四、提高哺乳动物细胞基因表达效率的策略
第二节 昆虫细胞表达系统
第三节 酵母表达系统
一、酵母菌基因表达载体的组成元件
二、酵母菌基因表达载体的类型
三、表达外源基因的常用酵母宿主菌
第七章 基因的表达和调控
第一节 真核表达和调控
一、真核生物表达系统
二、真核生物中的表达调控
第二节 原核表达和调控
一、原核生物表达系统
二、原核生物中的表达调控
第三节 翻译后的加工
一、一级结构的修饰
二、高级结构的修饰
第八章 基因工程药物的分离纯化与鉴定
第一节 基因工程药物分离的原理
一、蛋白质分子形状、大小和密度
二、蛋白质分子的酸碱性质和等电点
三、蛋白质的溶解度
四、蛋白质分子表面的性质
五、蛋白质的特异结合力
六、反常性质
七、蛋白质折叠与蛋白质分子相互作用力
第二节 基因工程药物的分离纯化
一、目标产物初步分离
二、目标产物精制纯化
第三节 基因工程药物的鉴定
一、理化性质的鉴定
二、蛋白质纯度检查
三、蛋白质含量测定
第二篇 DNA特殊技术与细胞因子
第九章 DNA序列分析
第一节 经典的DNA序列分析原理及方法
……
第十章 基因芯片
第十一章 DNA诱变
第十二章 细胞因子
第十三章 重组凝血因子和纤溶酶原激活物
第十四章 造血生长因子和其他生长因子
第十五章 多肽类药物
第三篇 其他基因工程药物
第十六章 基因工程抗体
第十七章 基因工程疫苗
第十八章 动物基因工程药物
第十九章 植物基因工程药物
第二十章 基因诊断
第二十一章 基因治疗与核酸类药物
第二十二章 基因组学和蛋白质组学方法在药物靶点发现中的应用
第二十三章 基因工程药物质量控制与安全性
后记 我国基因工程药学学科发展的战略构想
中英文对照索引
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