生物技术原理与实验

　　上篇生物技术原理
　　第一章基因工程技术
　　第一节克隆载体
　　第二节重组DNA技术
　　第三节基因文库的构建
　　第四节PCR技术
　　第五节核酸分子杂交技术
　　第六节DNA测序技术
　　第七节转基因技术
　　第二章蛋白质及酶工程技术
　　第一节蛋白质的提取与粗分级
　　第二节蛋白质的细分级
　　第三节蛋白质的鉴定
　　第四节蛋白质结构测定
　　第五节定点突变技术
　　第六节蛋白质的原核和真核表达技术
　　第七节酶工程（酶蛋白工程）概述
　　第三章细胞工程技术
　　第一节植物细胞工程技术
　　第二节动物细胞工程技术
　　第四章发酵工程技术
　　第一节微生物发酵方式
　　第二节发酵过程
　　第五章其他常用技术
　　第一节功能基因的克隆技术
　　第二节基因表达分析技术
　　第三节RNA干扰（RNAi）技术
　　第四节双向电泳技术
　　第五节毛细管电泳技术
　　第六节酵母双杂交技术
　　下篇基本实验
　　第六章基因工程实验
　　实验一碱裂解法提取质粒DNA
　　实验二DNA酶切及琼脂糖凝胶电泳
　　实验三大肠杆菌感受态细胞的制备和质粒DNA的转化
　　实验四.PCR扩增DNA特异性片段
　　实验五真核生物基因组DNA的提取
　　实验六植物组织总RNA的提取及变性电泳
　　实验七Northern杂交
　　实验八基因组文库的构建
　　实验九cDNA文库的构建
　　实验十动物转基因技术--动物细胞的磷酸钙沉淀转化法
　　实验十一植物转基因技术--农杆菌介导的花芽浸泡法转化拟南芥植株
　　实验十二植物转基因技术--农杆菌介导的双子叶植物叶盘转化法
　　第七章蛋白质及酶工程实验
　　实验一生物组织总蛋白质的提取
　　实验二考马斯亮蓝法测定蛋白质含量
　　实验三变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）测定蛋白质亚基分子量
　　实验四大肠杆菌中重组蛋白质的诱导表达与亲和层析纯化
　　实验五蛋白质的免疫印迹分析
　　实验六Edman降解法测定小肽的氨基酸序列
　　实验七蛋白质结晶
　　实验八酶的基本特性
　　实验九绿色荧光蛋白（GFP）定点突变
　　第八章细胞工程实验
　　实验一MS培养基母液的配制
　　实验二培养基的配制与灭菌
　　实验三植物培养材料的灭菌与接种
　　实验四种胚的离体培养
　　实验五愈伤组织的诱导
　　实验六悬浮细胞系的建立
　　实验七植物原生质体的游离和融合
　　实验八草莓遗传转化实验（农杆菌介导法）
　　实验九水稻悬浮细胞的遗传转化实验（基因枪法）
　　实验十动物组织的消化培养及单细胞的获得
　　第九章发酵工程实验
　　实验一凝固型酸奶的制作
　　实验二纤维素酶生产（一）--固体发酵法生产纤维素酶
　　实验三纤维素酶生产（二）--分级盐析法纯化纤维素酶
　　实验四纤维素酶生产（三）--凝胶过滤层析法纯化纤维素酶
　　实验五四环素发酵代谢曲线的绘制
　　第十章综合设计实验
　　实验一溶菌酶的纯化、结晶与酶活测定
　　实验二种子蛋白质含量及组成分析
　　实验三植物蛋白酶的分离纯化与鉴定
　　实验四绿色荧光蛋白的原核表达、纯化及鉴定
　　实验五转绿色荧光蛋白基因烟草的获得及鉴定
　　实验六大肠杆菌碱性磷酸酶定点诱变与酶活分析
　　附录
　　附录一实验室规则
　　附录二实验室安全及防护
　　附录三常用仪器的使用
　　附录四常用因特网网址
　　附录五常用缓冲溶液及试剂的配制
　　附录六常用实验数据

　　    徐小静，女，湖北省浠水县人。2003年7月毕业于中国农业大学生物学院，并获得生物化学与分子生物学博士学位。同年进入中央民族大学生命与环境科学学院任教。现为讲师，主要讲授《分子生物学》、《现代生物技术》等课程，并开设有《生物技术》实验课程，发表论文5篇，其中SCI文章3篇。
　　    张少斌，男，博士，沈阳农业大学生物科学技术学院副教授，主要讲授《生物化学》等课程。
　　    王俊丽，女，博士，中央民族大学生命与环境科学学院教授，研究方向为植物细胞工程。

　　    《生物技术原理与实验》分为上、下两篇，上篇主要介绍现代生物技术主要领域的基本原理，包括基因工程、蛋白质及酶工程、细胞工程、发酵工程及其他常用技术；下篇为基本实验，包括生物技术领域中的基础实验。书末的附录包括实验室规则、实验室安全及防护、常用仪器的使用、常用因特网网址、常用缓冲溶液及试剂的配制和常用实验数据，供需要这些知识的读者参考。