前言
概述
一、基因工程
二、基因工程的发展历程
三、基因工程研究现状及发展趋势
上篇 动物基因工程的分子生物学基础
第一章 动物基因的结构与组合
第一节 动物基因的分子结构
一、DNA的碱基组成
二、DNA的一级结构
三、DNA的二级结构
四、染色体
第二节 动物基因的重复序列
一、动物基因的重复序列
二、动物DNA重复序列的组织形式
第三节 动物基因的组织形式
一、动物基因的不连续性
二、基因家族和基因簇
三、串联重复基因
四、侧翼序列
第四节 基因及基因组的大小
一、动物基因的大小
二、动物基因组的大小
第五节 线粒体基因组
第二章 DNA复制
第一节 DNA复制机制
一、半保留复制
二、方式和滚环方式
第二节 DNA的复制过程
一、复制的起始和方向
二、DNA双螺旋的解开
三、RNA引物的合成
四、半不连续复制
五、引发和引发体
六、链的延伸
七、链的终止
八、复制的忠实性
第三节 动物染色体DNA复制
一、动物DNA复制起始点与起始
二、延伸
三、复制终止
四、端粒的复制
第三章 动物基因的转录及转录水平的调控
第一节 转录的机制
一、转录起始
二、转录的延伸
三、转录终止
第二节 基因转录产物的后加工
一、rRNA的转录后加工
二、tRNA的转录后加工
三、mRNA的转录与后加工
第三节 真核基因转录水平的调控
一、基因结构的活化
二、转录起始的调控
三、转录过程的调控
第四章 蛋白质的生物合成及翻译水平的调控
第一节 遗传密码
第二节 tRNA及其功能
第三节 核糖体的结构和装配
第四节 真核生物蛋白质的合成
一、原核生物蛋白质生物合成机制
二、真核生物蛋白质的生物合成
第五节 蛋白质翻译初始产物的修饰：
第六节 翻译水平的调控
一、翻译因子磷酸化调控
二、转铁蛋白mRNA翻译的调控模式
下篇 动物基因工程操作
第五章 基因工程中的常用技术
第一节 凝胶电泳技术
一、凝胶电泳的基本原理
二、琼脂糖凝胶电泳
三、聚丙烯酰胺凝胶电泳
第二节 核酸分子杂交技术
一、放射性同位素标记的DNA探针的制备
二、待测核酸的处理
三、杂交及杂交后漂洗
四、自显影
第三节 细菌转化
第四节 DNA核苷酸序列分析技术
一、sanger双脱氧链终止法
二、Maxam-GilbenDNA化学降解法
第五节 PCR扩增技术
一、基本原理
二、PCR的设计和参数
三、PCR技术的应用
第六章 基因工程常用的酶类
第一节 限制性核酸内切酶和DNA分子的体外切割
一、Ⅱ类限制性内切酶的基本特点
二、限制性内切酶的来源及命名
三、影响限制性内切酶活性的因素
四、限制性内切酶酶切图谱分析
第二节 DNA连接酶与DNA分子的体外连接
一、DNA连接酶
二、DNA的连接方法
第三节 DNA聚合酶及其在基因工程中的应用
一、大肠杆菌DNA聚合酶I(全酶)
二、大肠杆菌DNA聚合酶I大片段(Klenow片段)
三、T4噬菌体DNA聚合酶
四、T7噬菌体DNA聚合酶
五、经修饰的T7噬菌体DNA聚合酶(测序酶)
六、TaqDNA聚合酶及AmpliTaqTMDNA聚合酶
七、反转录酶(依赖于RNA的DNA聚合酶)
八、末端转移酶(末端脱氧核苷酸转移酶)
第四节 核酸外切酶及核酸内切酶
一、核酸外切酶
二、核酸内切酶
第五节 其他DNA和RNA的修饰酶及其应用
第七章 基因工程的载体和宿主表达系统
第一节 细菌质粒载体
一、质粒的基本特性
二、不同用途的细菌质粒载体
第二节 噬菌体载体
一、入噬菌体
二、M13噬菌体
第三节 酵母系统载体
一、酵母整合质粒
二、酵母复制子质粒
三、酵母游离基因载体
第四节 动物病毒载体
一、病毒颗粒载体
二、病毒DNA混合型载体
第五节 原核细胞表达系统
一、影响真核基因在大肠杆菌中表达的主要因素
二、外源基因在大肠杆菌细胞内表达重组蛋白
三、重组蛋白分泌到周质
四、重组蛋白分泌到胞外培养基中
第六节 真核细胞表达系统
一、酵母表达系统
二、哺乳动物细胞表达系统
第七节 个体表达系统
第八章 基因工程的基本操作程序
第一节 基因工程的基本程序
第二节 DNA体外重组和扩增
一、目的基因的制备和载体基因的选择与改造
二、目的DNA片段与载体DNA体外重组
三、重组子的扩增
第三节 重组DNA分子的选择与鉴定
一、抗性选择
二、从转化菌落快速提取质粒鉴定大小选择重组质粒
三、快速提取质粒进行酶切鉴定
……
第九章 转基因动物
第十章 动物细胞工程
第十一章 动物基因治疗与基因免疫
英文缩写
主要参考文献
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