目录前言常用生物化学实验词汇及缩写第一部分 生物化学样品制备技术 1第二部分 沉淀技术 8第三部分 膜分离技术 13第四部分 色谱技术 22实验一 分子筛层析 28血清蛋白质盐析及分子筛层析脱盐 32实验二 离子交换层析 34离子交换层析纯化血清蛋白 36实验三 亲和层析 39亲和色谱分离GST融合蛋白 41第五部分 分光光度技术 44实验四 蛋白质的定量检测 49蛋白质的直接定量(UV)检测 49比色法蛋白质定量 50实验五 氨基酸的定量测定 54实验六 色氨酸的定量测定 56实验七 超氧化物歧化酶活力测定(邻苯三酚自氧化法) 59实验八 核酸含量的测定 61紫外吸收法测定核酸含量 61DNA含量测定——改良二苯胺法 62RNA的测定——苔黑酚法 63实验九 血液葡萄糖的测定 65邻甲苯胺法 65葡萄糖氧化酶法 67实验十 血清钙的测定 70邻甲酚酞络合酮法 70甲基麝香草酚蓝比色法 71实验十一 血清无机磷的测定 73硫酸亚铁磷钼蓝比色法 73紫外光光度法 74米吐尔直接显色法 75实验十二 血清甘油三酯(TG)的测定 77实验十三 血清胆固醇的测定 78实验十四 血液尿酸的测定 80实验十五 抗坏血酸(维生素C)的测定 82实验十六 维生素 A的测定 84第六部分 离心技术 86实验十七 动物肝脏DNA的提取和鉴定 90实验十八 质粒DNA的制备 93实验十九 兔肝RNA的制备及其含量测定 96实验二十 差速离心法分离大鼠肝脏细胞核和线粒体 101实验二十一 家兔血清、血浆和无蛋白血滤液的制备 103血清的分离与制备 103血浆的分离与制备 104无蛋白血滤液的制备 104第七部分 电泳技术 107实验二十二 不连续聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳分离血清蛋白质 114实验二十三 SDS-不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质分子质量 121实验二十四 聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳测定蛋白质的等电点 126实验二十五 聚丙烯酰胺凝胶浓度梯度电泳测定蛋白质的分子质量 136实验二十六 琼脂糖凝胶电泳分离血清乳酸脱氢酶同工酶 140实验二十七 醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白质 144实验二十八 琼脂糖凝胶电泳分离DNA 147实验二十九 蛋白质双向电泳 150第八部分 印迹技术 158实验三十 蛋白质印迹 164实验三十一 核酸印迹 171第九部分 酶联免疫吸附测定技术 177实验三十二 酶联免疫法测定兔血清IgG 185第十部分 放射免疫测定技术 188实验三十三 放免法测定血清cAMP 199第十一部分 蛋白质结构分析技术 203实验三十四 DNS-Cl法测定蛋白质的N端氨基酸 204实验三十五 蛋白质C端氨基酸的测定及顺序分析(羧肽酶法) 208实验三十六 蛋白质及多肽顺序分析(DABITC/PITC双偶合法) 211附录 215一、常用缓冲溶液的配制 215二、易变质及需要特殊方法保存的试剂 226三、离心机和转数的换算 227四、硫酸铵饱和度常用表 228五、某些物质燃烧时应用的灭火剂 229六、几种常用实验动物的采血量和采血方法 230七、干燥器内常用的干燥剂 230八、测定蛋白质浓度的方法 231九、SDS-PAGE中通常选用的标准蛋白质的分子质量 231主要参考文献 232
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