家蚕转基因技术及应用

　　第一章
　　家蚕与家蚕转基因
　　第一节  家蚕    
　　第二节  家蚕转基因    
　　        一、 家蚕转基因的特点 / 
　　二、 家蚕转基因的早期研究 / 
　　三、 家蚕转基因研究现状与发展 / 
　　参考文献    
　　第二章
　　家蚕转基因的载体构建
　　第一节  目的基因的获得    
　　        一、 从基因组DNA文库获取目的基因 / 
　　二、 从cDNA文库获取目的基因 / 
　　三、 通过PCR技术分离目的基因 / 
　　四、 利用电子克隆获取目的基因 / 
　　五、 人工合成目的基因 / 
　　第二节  启动子的选择    
　　        一、 组成型启动子 / 
　　二、 诱导型启动子 / 
　　三、 组织特异性启动子 / 
　　四、 家蚕RNA聚合酶Ⅲ启动子 / 
　　第三节  标记基因    
　　        一、 荧光蛋白基因 / 
　　二、 荧光素酶基因 / 
　　三、 抗性筛选基因 / 
　　四、 其他可视化标记基因 / 
　　第四节  调控元件    
　　        一、 内含子 / 
　　二、 增强子 / 
　　三、 非翻译区 / 
　　四、 绝缘子 / 
　　五、 其他调控元件 / 
　　第五节  家蚕转基因常用载体    
　　        一、 转座载体 / 
　　二、 基因打靶载体 / 
　　三、 人工核酸酶表达载体 / 
　　四、 其他类型载体 / 
　　第六节  转基因载体构建流程    
　　        一、 pSL-FibH-EGFP-LBS中间载体的构建 / 
　　二、 piggyBac重组转座载体的构建 / 
　　参考文献    
　　第三章
　　家蚕外源基因导入技术
　　第一节  胚胎显微注射技术    
　　        一、 家蚕胚胎显微注射仪器的诞生与发展 / 
　　二、 家蚕胚胎显微注射操作流程 / 
　　第二节  精子介导基因转移技术    
　　        一、 家蚕精子介导转基因技术的建立 / 
　　二、 家蚕精子介导转基因操作流程 / 
　　第三节  其他外源基因导入技术    
　　        一、 电穿孔法 / 
　　二、 压力渗透法 / 
　　三、 基因枪法 / 
　　四、 病毒介导法 / 
　　五、 脉冲场电泳法 / 
　　参考文献    
　　第四章
　　转基因家蚕的筛选与鉴定
　　第一节  转基因家蚕的筛选    
　　        一、 荧光标记 / 
　　二、 显性颜色变化标记 / 
　　三、 其他表型变化识别标记 / 
　　第二节  外源基因的整合与表达分析    
　　        一、 外源基因的整合分析 / 
　　二、 外源基因的表达分析 / 
　　第三节  外源基因表达产物的生物活性及功能检测    
　　        一、 表达产物的生物活性分析 / 
　　二、 表达产物的功能测试 / 
　　第四节  内源基因定点突变家蚕的鉴定    
　　        一、 T7E1酶切鉴定内源基因定点突变家蚕 / 
　　二、 其他鉴定突变个体的核酸内切酶 / 
　　三、 限制性内切酶酶切检测法 / 
　　参考文献    
　　第五章
　　基于转座子系统的家蚕基因功能分析技术
　　第一节  GAL4/UAS双元调控技术    
　　        一、 GAL4/UAS系统的基本原理 / 
　　二、 家蚕GAL4/UAS系统的建立 / 
　　第二节  转基因RNAi技术    
　　第三节  序列捕获技术    
　　第四节  基因特异表达调控技术    
　　        一、 热激诱导表达技术 / 
　　二、 四环素诱导表达技术 / 
　　参考文献    
　　第六章
　　家蚕基因组编辑技术
　　第一节  家蚕条件基因打靶技术    
　　        一、 位点特异性重组系统概述 / 
　　二、 基于位点特异性重组系统的家蚕条件基因打靶策略 / 
　　第二节  家蚕基因组靶向编辑技术    
　　        一、 基因组靶向编辑技术概述 / 
　　二、 家蚕基因组靶向编辑技术的建立与发展 / 
　　第三节  家蚕基因组编辑技术的优缺点及其发展趋势    
　　参考文献    
　　第七章
　　转基因家蚕新品种培育
　　第一节  转基因有色茧家蚕新品种培育    
　　        一、 基于色素转运获得的转基因有色茧 / 
　　二、 转荧光蛋白基因有色茧品种培育 / 
　　第二节  高机械性能转基因茧丝家蚕新品种培育    
　　        一、 转蜘蛛丝蛋白基因改良茧丝机械性能 / 
　　二、 转羊毛角蛋白相关蛋白基因改良茧丝机械性能与染色性能 / 
　　第三节  实用性蚕品种转基因技术的建立与应用    
　　        一、 实用性蚕品种转基因技术的建立 / 
　　二、 实用性蚕品种转基因技术的应用 / 
　　第四节  其他转基因家蚕新品种培育    
　　        一、 抗病性转基因家蚕品种培育 / 
　　二、 提高蚕丝产量的转基因家蚕品种培育 / 
　　三、 用作药物筛选模型的转基因家蚕品种培育 / 
　　参考文献    
　　第八章
　　转基因家蚕生物反应器
　　第一节  丝腺生物反应器    
　　        一、 丝腺特异表达系统 / 
　　二、 丝腺生物反应器表达的外源蛋白 / 
　　第二节  脂肪体生物反应器    
　　第三节  转基因蚕表达外源蛋白存在的问题    
　　参考文献    
　　第九章
　　家蚕基因功能鉴定与应用
　　第一节  丝蛋白合成与分泌机理    
　　        一、 丝蛋白基因表达与调控 / 
　　二、 茧丝突变家蚕的突变机理 / 
　　三、 丝腺离子环境变化对蚕丝分泌的影响 / 
　　第二节  变态发育与激素调节    
　　        一、 家蚕保幼激素调控研究 / 
　　二、 家蚕蜕皮激素调控研究 / 
　　三、 其他家蚕变态发育相关神经肽激素调控研究 / 
　　第三节  性别决定与调控    
　　        一、 Bmdsx基因的功能分析 / 
　　二、 基于Bmdsx基因的性别调控研究 / 
　　三、 性别特异性基因启动子鉴定研究 / 
　　第四节  抗病机理研究    
　　        一、 家蚕内源抗病或免疫相关基因功能鉴定 / 
　　二、 病毒抗性相关基因启动子鉴定研究 / 
　　第五节  食性及化学感受受体研究    
　　        一、 桑树尿素酶基因在家蚕体内表达研究 / 
　　二、 家蚕化学感受受体研究 / 
　　参考文献    
　　第十章
　　家蚕安全转基因技术体系的建立与应用
　　第一节  转基因家蚕存在的主要安全问题    
　　        一、 转基因家蚕自身安全性问题 / 
　　二、 转基因家蚕带来的生态环境安全隐患 / 
　　第二节  基于条件基因打靶的家蚕安全转基因体系建立    
　　        一、 克服转座子随机整合引起的家蚕转基因安全隐患 / 
　　二、 克服筛选标记基因保留带来的家蚕转基因安全隐患 / 
　　三、 实现外源基因稳定整合、表达以及精确替换的家蚕安全转基因策略 / 
　　第三节  家蚕安全转基因技术的发展趋势    
　　        一、 不同位点特异性重组系统的联合应用 / 
　　二、 基因组靶向编辑技术与位点特异性重组系统的联合应用 / 
　　参考文献    
　　第十一章
　　家蚕细胞转基因技术及其应用
　　第一节  家蚕细胞系种类与特征    
　　第二节  家蚕细胞转基因技术的建立    
　　        一、 常用载体 / 
　　二、 家蚕细胞转染方法 / 
　　第三节  家蚕转基因细胞的应用    
　　        一、 家蚕转基因细胞系 / 
　　二、 基因功能研究 / 
　　三、 高效表达外源蛋白 / 
　　参考文献    
　　第十二章
　　转基因家蚕的安全评价与安全管理
　　第一节  概述    
　　        
　　一、 转基因生物及其安全性 / 
　　二、 转基因生物安全性评价与安全管理 / 
　　第二节  安全评价    
　　        
　　一、 评价体系 / 
　　二、 评价原则 / 
　　三、 评价内容和方法 / 
　　第三节  安全管理    
　　        
　　一、 安全管理的目标、任务和原则 / 
　　二、 我国的安全管理体系 / 
　　三、 安全管理的理念与问题 / 
　　第四节  我国转基因家蚕的安全评价与管理    
　　        
　　一、 我国转基因家蚕的安全评价与管理现状 / 
　　二、 我国转基因家蚕实验室研究的安全管理 / 
　　参考文献    
　　后记    

　　向仲怀：中国工程院院士，国际著名蚕桑科学家。主要研究领域为蚕桑基因组与遗传学。已出版《蚕丝生物学》等专著8部，在Science等杂志上发表学术论文200余篇，其中SCI收录文章影响因子合计逾300分。获国家自然科学奖1项、省部级科技进步奖和自然科学奖多项。
　　向仲怀院士主持创建了农业部蚕学重点实验室和全国重点学科，主持国家自然科学基金重点课题、国家攻关课题、省部级课题20余项，并组织团队获得国家“973”、“863”、“948”等重大项目。主持中国家蚕基因组计划，于2003年完成世界上第一张高质量家蚕基因组框架图，该成果为中国科学家继人类基因组、水稻基因组后的又一重大贡献。
　　赵爱春：国家蚕桑体系育种功能室主任，西南大学教授，主要研究领域为遗传学。已发表学术论文70余篇，其中SCI收录23篇。获授权发明专利10项、农业部“中华农业科技奖”二等奖1项。

　　《家蚕转基因技术及应用》一书为“十三五”国家重点图书出版规划项目。
　　本书是当今国内外对家蚕转基因的理论研究、技术方法、应用和安全管理介绍系统、全面的专著。
　　本书出版将为研究人员利用转基因技术改良家蚕，推动家蚕转基因技术和转基因家蚕在基因功能研究、生物反应器开发、新型蚕丝材料创制、安全转基因体系建立等研究领域的研究和应用提供有益参考。另外，家蚕是转基因研究和应用深入和广泛的模式昆虫之一，其科研成果可供广大科技工作者开展昆虫乃至其他生物种转基因研究提供理论、方法及实践的补益。
　　书中内容分12章，分别介绍了家蚕转基因的技术路线，家蚕转基因的载体构建，外源基因导入技术，转基因家蚕的内外源基因整合、功能检测，基因定点突变家蚕的鉴定与筛选，家蚕转基因中特异序列捕获技术、基因特异性表达调控技术、条件基因打靶技术、基因组编辑技术，转基因家蚕素材创新、滞育性蚕品种转基因体系的建立，转基因家蚕的安全管理和安全评价等。